Journal of Hainan Medical University(中文版)

2022年第28卷第19期文章目次

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  • 1  特色黎药高良姜改善胰岛素抵抗作用研究
    郑秀炆,文欢,张俊清,黄玉芳,张钰昕,刘爱霞,李湘怡,高亚男,张旭光
    2022, 28(19):1441-1445. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20211028.001
    [摘要](465) [HTML](0) [PDF 553.12 K](715)
    摘要:
    目的:研究特色黎药高良姜改善胰岛素抵抗(IR)的作用,为高良姜临床应用于糖尿病的辅助治疗提供科学依据。方法:利用CCK8试剂盒检测0~200 µg/mL高良姜提取物(AOE)和0~100 µmol/L高良姜素对HepG2细胞活力的影响,以确定给药浓度;采用高糖诱导HepG2细胞48 h建立IR模型,罗格列酮(ROSI)作为阳性对照药;通过流式细胞仪和葡萄糖检测试剂盒检测AOE和高良姜素对IR‑HepG2细胞内、外葡萄糖含量的影响,评价高良姜调节葡萄糖代谢改善IR的功效;利用Western blot实验检测AOE和高良姜素对IR‑HepG2细胞中葡萄糖转运蛋白‑4(GLUT4)表达的影响。结果:CCK8试剂盒检测结果显示0~200 µg/mL AOE和0~50 µmol/L高良姜素对HepG2细胞活力没有显著影响;流式细胞术和葡萄糖检测试剂盒结果显示高糖诱导IR的模型组细胞较空白组细胞的葡萄糖摄取量与消耗量均有明显的降低,IR模型成功建立;50 µg/mL AOE和10、20 µmol/L高良姜素均明显增加了IR‑HepG2细胞的葡萄糖摄取量和消耗量(P<0.05);Western blot结果表明AOE和高良姜素显著增加了IR‑HepG2细胞GLUT4蛋白水平(P<0.01)。结论:高良姜通过上调GLUT4蛋白的表达促进IR‑HepG2细胞对葡萄糖的摄取和消耗,改善IR增强胰岛素的敏感性。
    2  家兔脑微血管内皮细胞的原代培养及鉴定
    马华根,刘昭德,刘海琴,唐元瑜
    2022, 28(19):1446-1450. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20220410.001
    [摘要](302) [HTML](0) [PDF 1.73 M](510)
    摘要:
    目的:建立一种简便高效的家兔脑微血管内皮细胞原代培养方法,为开展脑血管疾病及相关研究提供重要的载体和工具细胞。方法:无菌条件下取家兔大脑皮质,经剪碎、过细胞筛网、牛血清白蛋白密度梯度离心、Ⅱ型胶原酶消化后接种培养;通过细胞形态学观察及血管形成实验鉴定所培养的细胞。结果:原代培养48 h后,有少量短梭形的内皮细胞从血管段周围爬出;72 h后,细胞以血管段为中心形成“岛屿样”“团簇状”的集落;4~5 d后细胞集落间相互融合成片,铺满皿底,呈典型的单层、鹅卵石样、镶嵌式排列。血管形成实验观察到所培养的目的细胞能够形成管腔样结构,结果显示为阳性。结论:该方法可成功分离培养出原代家兔脑微血管内皮细胞。
    3  骨痹通消颗粒调控成血管化与细胞凋亡干预兔激素性股骨头坏死
    朱彩玉,周正新,顾一帆,韩士鼎,徐寰,王壮壮,朱磊
    2022, 28(19):1451-1457. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20220728.001
    [摘要](303) [HTML](0) [PDF 2.61 M](516)
    摘要:
    目的:探讨骨痹通消颗粒对糖皮质激素致股骨头坏死过程中血管形成及细胞凋亡的干预作用。方法:将30只实验用新西兰兔随机分组,除对照组外,使用脂多糖联合糖皮质激素建立模拟激素性股骨头坏死动物模型。造模成功后,实验组给予骨痹通消颗粒灌胃治疗,模型组和对照组则给予等量生理盐水灌胃,1次/d,持续8周后处死实验动物,取出各组兔双侧股骨头进行苏木精-伊红染色并对蛋白CD34、CYR61及VEGF进行免疫组化染色定位;采用TUNEL染色法观察股骨头区细胞凋亡情况;WB检测凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达水平;RT-qPCR分析VEGF、eNOs、Bax及Bcl-2等基因表达情况。结果:与模型组相比,骨痹通消颗粒能够减少骨组织中空骨陷窝数和凋亡阳性细胞数(P<0.01),上调股骨头组织中CD34、CYR61及VEGF表达。与对照组相比,模型组中促凋亡蛋白Bax的表达量增多且抗凋亡蛋白Bcl-2、VEGF及eNOs mRNA的表达量下降明显(P<0.01),实验组经骨痹通消颗粒干预治疗后得到相反的结果(P<0.05)。结论:骨痹通消颗粒能够提高激素性股骨头坏死兔模型骨组织中成血管基因表达量并调控凋亡相关蛋白,促进其成血管分化并抑制细胞凋亡,进而发挥治疗激素性股骨头坏死的作用。
    4  富马酸氯马斯汀对肠缺血再灌注小鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究
    刘洋,刘婕婷,王迎斌
    2022, 28(19):1458-1462. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20220803.002
    [摘要](323) [HTML](0) [PDF 791.64 K](594)
    摘要:
    目的:评价富马酸氯马斯汀(CLE)对肠缺血再灌注(I/R)小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及其机制。方法:将24只SPF级Balb/c小鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、富马酸氯马斯汀预处理组(I/R+C组),I/R组建立肠缺血再灌注模型(缺血40 min,再灌注2 h),I/R+C组手术开始前腹腔注射CLE 5 mg/kg。采用HE染色观察肺组织形态并评分,测定肺湿重/干重(W/D)比值,ELISA法测定各组肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃px)、核因子⁃κB(NF⁃κB)及肿瘤坏死因子(TNF⁃α)水平,Western blot法测定肺内TLR4的表达量。结果:与Sham组相比,I/R组肺损伤评分及W/D比值增加,肺内MDA水平增加,SOD、GSH⁃px水平降低,NF⁃κB、TNF⁃α水平增加,TLR4表达上调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与I/R组相比,I/R+C组肺损伤评分及W/D比值降低,肺内MDA水平降低,SOD、GSH⁃px水平增加,NF⁃κB、TNF⁃α水平降低,TLR4的表达下调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:富马酸氯马斯汀可减轻小鼠肠缺血再灌注后急性肺损伤,其机制可能与抑制肺组织氧化应激和炎症反应有关。
    5  基于网络药理学探讨黄芪治疗糖尿病心肌病的作用机制及初步验证研究
    孟庆雯,刘华江,丁顺,黄珊,杨洋,张玉卓,杨珊珊,左琦,谢毅强
    2022, 28(19):1463-1471. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20211028.003
    [摘要](386) [HTML](0) [PDF 2.79 M](773)
    摘要:
    目的:通过网络药理学,探索黄芪的活性成分,挖掘黄芪治疗糖尿病心肌病的靶基因点及作用机制。基于预测结果,在糖尿病心肌病模型小鼠对关键信号通路进行验证。方法:借助中药系统药理学平台(TCMSP)检索黄芪,设定ADME参数,明确其有效活性成分及对应靶点,通过STRING数据库将蛋白名称统一转换为对应的“Gene Symbol ID”。应用DisGeNET数据库得到糖尿病心肌病发生发展的作用基因,运用STRING数据库构建药物及疾病重叠基因蛋白‑蛋白相互作用网络(PPI网络),采用Cytoscape 3.6.0构建疾病‑药物‑靶基因网络图和通过Cytohuba插件筛选出10个最为密切的靶基因。然后,将重叠基因进行基因本体(GO)和基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)的富集分析。动物实验采用21只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、中药黄芪组,每组7只。对各组小鼠心肌进行HE染色对比病理形态变化,同时采用Western Blot对MAPK信号通路关键分子ERK1、p‑p38进行比较。结果:黄芪包含了20个活性成分,相应的靶点188个,糖尿病心肌病的相关靶点 220 个,与黄芪重叠的靶点 37个;将黄芪与糖尿病心肌病的共同靶点导入STRING数据库,得到重叠基因PPI网络图,共有37个节点,391条边。将PPI网络图导入到Cytoscape 3.6.0软件中,采用cytoHubba插件中的MCC算法得到最为显著的前10位hub基因,分别为AKT1、TP53、CASP3、MMP9、EGF、IL‑10、CXCL8、IL‑1β、VEGFA、PPARG。GO功能富集分析得到生物过程(biological process,BP)条目 40 个,细胞组成(cellular component,CC)条目 23 个,分子功能(molecular function,MF)条目 22 个, KEGG 通路富集筛选得到 94 条信号通路主要涉及 PI3K‑AKT、 MAPK、 HIF‑1、 FOXO、 TNP pathway等炎症或凋亡调控途径等;动物实验显示黄芪可以改善糖尿病心肌病小鼠心肌组织的炎症状态,模型组心肌组织ERK1、p‑p38蛋白表达高于正常组,采用黄芪进行干预后,ERK1、p‑p38蛋白表达明显低于模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪治疗糖尿病心肌病具有多靶点、多成分、多通路的作用特点,可通过调控MAPK信号通路ERK1、p‑p38等蛋白表达,发挥抗炎、抗氧化应激等作用。
    6  对海南省210例散发性先天性单纯性心脏病患者NKX2-5、GATA4、ZIC3基因突变的筛选研究
    李青蔓,郭丰,凌奕,李慧慧,刘芳芳,刘辉,温壮飞,孙薇薇,刘亦恒,张海英
    2022, 28(19):1472-1478. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20220610.001
    [摘要](335) [HTML](0) [PDF 1.08 M](534)
    摘要:
    目的:心脏发育异常可导致先天性心脏病(congenital heart disease, CHD),是国内外最常见的先天性畸形,已知NKX2-5、GATA4和ZIC3基因突变可引起CHD。本实验探讨了海南省NKX2-5、GATA4、ZIC3基因突变和散发性先天性单纯性心脏病之间的关系。方法:收集210例散发性CHD患者,提取患者血液DNA,扩增目的基因片段,利用高分辨熔解曲线(high-resolution melting, HRM)技术和DNA测序技术,分析NKX2-5、GATA4和ZIC3基因的序列。结果:对210例CHD患者NKX2-5、GATA4、ZIC3基因测序,发现7个基因突变,包括1个NKX2-5杂合错义突变(c.178G>T),GATA4的3个杂合突变(c.677C>T,c.928A>G,c.1123G>A),ZIC3的3个杂合突变(c.19G>C,c.1255C>G,c.1348C>T)。其中NKX2-5(c.178G>T)、GATA4(c.1123G>A)、ZIC3(c.19G>C,c.1255C>G,c.1348C>T)为新突变位点。通过生物信息学软件预测这些基因突变为致病性突变。结论:在210例患者中发现了7个基因突变,首次报道海南省NKX2-5、GATA4和ZIC3的基因突变与CHD发病相关。
    7  HRT⁃FET周期中内膜转化日E2水平对妊娠结局的影响
    林思婷,谢宝国
    2022, 28(19):1479-1484. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20220505.001
    [摘要](366) [HTML](0) [PDF 507.05 K](725)
    摘要:
    目的:探讨激素替代治疗⁃解冻胚胎移植(HRT⁃FET)周期内膜转化日血清E2水平对妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2014年12月~2019年12月在海南医学院第一附属医院生殖中心行HRT⁃FET治疗的834个卵裂期胚胎移植周期。根据子宫内膜黄体酮转化日子宫内膜分型将患者分为A组236个周期(A型子宫内膜),B组598个周期(B型子宫内膜),然后再根据子宫内膜转化日血清E2水平中位数将A组和B组各分为2个亚组,A1组E2≤827 pmol/L(118个周期);A2组E2>827 pmol/L(118个周期);B1组E2≤867 pmol/L(303个周期);B2组E2>867 pmol/L(295个周期)。分别比较各组一般资料、种植率、临床妊娠率、流产率、异位妊娠率和活产率。结果:A组移植胚胎数高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);B组子宫内膜转化日的厚度、内膜转化日P水平显著高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),A、B两组的临床妊娠率、种植率、流产率、异位妊娠率、生化妊娠率、活产率差异均无统计学意义(P>0.05);A1组与A2组、B1组与B2组患者的一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05);B1、B2两组的临床妊娠率、种植率、流产率、异位妊娠率、生化妊娠率、活产率差异均无统计学意义(P>0.05);A2组的临床妊娠率、种植率、活产率均显著高于A1组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:激素替代治疗⁃解冻胚胎移植周期中子宫内膜A或B型对妊娠结局无明显影响;在A型子宫内膜中,当内膜转化日血清E2>827 pmol/L,有助于改善冻融胚胎移植的妊娠结局。
    8  基于louvain算法生脉注射液治疗AP的真实世界优效方案研究
    黄萍萍,孙春全,马晓昌,刘福梅,侯恒悦,谢雁鸣
    2022, 28(19):1485-1492. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20211022.001
    [摘要](354) [HTML](0) [PDF 1.06 M](459)
    摘要:
    目的:挖掘生脉注射液治疗心绞痛(AP)的优效方案供临床医生借鉴。方法:基于中国中医科学院中医临床基础医学研究所建立的大型数据仓库,采集了全国22家三级甲等医院的医院信息系统(hospital information system,HIS),选取1 751例使用生脉注射液后AP症状好转的患者,采用Louvain算法及复杂网络分析方法,总结出在使用生脉注射液基础上,联合其他药物治疗AP的用药方案。结果:针对症状治疗,联合使用硝酸酯类药物或速效救心丸扩张冠状动脉;针对AP的危险因素治疗,联合使用“胰岛素+阿卡波糖+比索洛尔+硝苯地平+卡托普利+艾司唑仑”控制血糖血压、“感冒清热颗粒+左氧氟沙星”治疗上呼吸道感染等用药方案;针对AP的并发症治疗,联合使用“呋塞米+螺内酯+氯化钾”减轻水肿、“硝酸异山梨酯+美托洛尔+参麦注射液+稳心颗粒”改善气阴两虚型心力衰竭用药方案。结论:生脉注射液联合中西医药物的治疗方案与现行指南基本一致,仍需要大量的临床研究来探索更多疗效显著的联合用药方案。
    9  盐酸小檗碱辅助治疗溃疡性结肠炎及对炎症因子影响的Meta分析
    季双双,刘子号,王梦媛,洪燕秋,尹毓章,张书信
    2022, 28(19):1493-1501. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20210514.002
    [摘要](458) [HTML](0) [PDF 4.76 M](675)
    摘要:
    目的:评价盐酸小檗碱治疗溃疡性结肠炎的临床疗效和其对炎症因子的影响。方法:检索中文数据库包括:维普中文期刊数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库(Wanfang Data)、中国知网(CNKI);检索英文数据库包括:PubMed, Embase, Web of Science, Cochrane Library中有关盐酸小檗碱治疗溃疡性结肠炎的随机对照研究,检索时间设定为建库至2021年4月28日,使用RevMan5.3软件对数据进行统计分析。结果:纳入8项研究,涉及658例溃疡性结肠炎患者。Meta分析表明, 治疗组有效率高于对照组,差异有统计学意义[OR=6.41,95%CI(3.25,12.65),Z=5.36, P<0.000 01];治疗组白细胞介素6 [MD=-13.64,95%CI(-14.88,-12.41),Z=3.99, P<0.000 01]、白细胞介素8 [MD=-13.41,95%CI(-15.11,-11.71),Z=15.46, P<0.000 01]、肿瘤坏死因子α [MD=-5.62,95%CI(-8.35,-2.89),Z=4.03,P<0.000 1]、疾病活动指数 [MD=-2.34,95%CI(-2.55,-2.14),Z=22.37, P<0.000 01]均低于对照组,差异均有统计学意义;治疗组白介素10[MD=6.49,95%CI(5.64,7.35),Z=14.86, P<0.000 01]高于对照组,差异有统计学意义,治疗组腹痛缓解时间[MD=-3.41,95%CI(-4.02,-2.79),Z=10.84, P<0.000 01]、腹泻缓解时间[MD=-2.5,95%CI(-2.86,-2.15),Z=13.87,P<0.000 01]、脓血便缓解时间[MD=-2.44,95%CI(-2.87,-2.00),Z=10.87, P<0.000 01]均短于对照组,差异有统计学意义。结论:盐酸小檗碱可通过降低炎症因子水平辅助治疗溃疡性结肠炎。
    10  中医祛湿法治疗寻常型银屑病的Meta分析
    陈文廷,向聪莲,闫玉红,卢传坚
    2022, 28(19):1502-1510. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20210701.003
    [摘要](619) [HTML](0) [PDF 7.15 M](1084)
    摘要:
    目的:应用Meta分析系统评价中医祛湿法治疗寻常型银屑病的临床效果及安全性。方法:计算机检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献服务系统、MEDLINE、Embase及Cochrane Library等数据库中使用祛湿法治疗银屑病的临床研究,检索时间范围自建库起至2021年6月。将检索到的文献进行筛选、数据提取和偏倚风险评估后,应用Revman5.3软件进行统计分析。结果:纳入24个临床研究,总计2 063例受试者,Meta分析的结果显示试验组在治疗总有效率[OR=3.31, 95%CI(2.55,4.31)]、降低PASI分数[MD=-2.57, 95%CI(-3.08,-2.06)]和改善生活质量[MD=-3.23, 95%CI(-3.70,-2.76)]方面均优于对照组,而不良反应则比对照组轻[OR=0.42,95%CI(0.29,0.61)]。结论:中医祛湿法能够安全有效地治疗寻常型银屑病,但鉴于纳入的研究总体质量偏低,仍需要更大样本、更高质量的临床试验以获得更充分的证据。
    11  TRP通道对心肌缺血再灌注损伤保护作用研究进展
    谢锋,段广靖,屈新亮,赵博,江娅妮,颜偌楠,张嘉豪,欧莉,高峰,李敏
    2022, 28(19):1511-1515. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20210320.001
    [摘要](339) [HTML](0) [PDF 400.53 K](806)
    摘要:
    瞬时受体电位(transient receptor potential, TRP)通道是一类位于细胞膜上的阳离子通道。 TRP通道被分为7个亚家族(TRPC、 TRPA、 TRPM、 TRPV、 TRPN、 TRPP和TRPML),在心肌组织中广泛表达。近年来,随着基因敲除和转基因模型动物的应用,发现TRP通道超家族成员中TRPM、TRPC和TRPV与心肌缺血再灌注损伤密切相关。TRP通道的激活或抑制参与了心肌缺血再灌注损伤的调控,减少了心肌的梗死面积,发挥保护作用。 因此, 本文首先对TRPM、 TRPC、 TRPV结构特征及其在心血管系统分布情况做了概述,再分别对TRPM、 TRPC、 TRPV调控心肌缺血再灌注的机制做了总结,为心肌缺血再灌注损伤的治疗提供一定的理论依据。
    12  基于肠道菌群探讨中医从脾论治老年性痴呆的研究进展
    肖钰雯,吴林,江家乔,宾新铭,蒋宇龙,陈炜
    2022, 28(19):1516-1520. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20210419.003
    [摘要](362) [HTML](0) [PDF 487.49 K](475)
    摘要:
    老年性痴呆(alzheimer's disease,AD)是一种临床上常见的中枢神经系统退行性变性疾病,发病机制复杂,严重危害老年人身心健康。近年来大量研究表明,肠道菌群可以通过脑⁃肠轴对中枢神经系统进行调控,从而参与AD的发生、发展。老年性痴呆属中医学“痴呆”、“善忘”范畴,由七情内伤、年老久病等致气血不足、肾精亏虚、痰瘀阻滞,使脑消髓减、神机失用,多从心肝肾论治。我们认为痰浊瘀血阻窍是AD的病机关键,当从脾论治,并针对病机特点提出温脾通络开窍法来防治AD。文章以肠道菌群为切入点,探讨中医从脾论治AD的研究进展。

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