Journal of Hainan Medical University(中文版)
2023年第2期文章目次
2023, 29(2):81-86.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221121.001
摘要:
目的：探讨抑制ROS⁃NLRP3信号通路对急性胰腺炎大鼠的保护作用以及相关分子机制。方法：将36只雄性SD大鼠随机分为对照组（NC组）、轻症急性胰腺炎模型组（AP组）、轻症急性胰腺炎+N⁃乙酰半胱氨酸干预组（AP+NAC组）、假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎模型组（SAP组），重症急性胰腺炎+N⁃乙酰半胱氨酸干预组（SAP+NAC组），每组6只。模型构造24 h后处死大鼠。苏木精⁃伊红（HE）染色观察大鼠胰腺组织病理改变并进行病理评分；二氢乙锭（DHE）荧光探针检测大鼠胰腺腺泡细胞ROS水平；WST⁃1法检测大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）水平；免疫组化法（IHC）检测大鼠胰腺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）蛋白表达；采用qPCR检测SO组、SAP组、SAP+NAC组肾脏组织中NLRP3 mRNA水平；采用ELISA检测血清中白细胞介素1β（IL⁃1β）和肿瘤坏死因子α（TNF⁃α）的水平。结果：与对照组比较，模型组胰腺组织病理学评分、ROS水平、NLRP3蛋白水平、肾脏组织NLRP3 mRNA水平、血清IL⁃1β和TNF⁃α含量明显升高（P<0.05），模型组SOD活性降低（P<0.05）；与模型组相比，NAC干预组胰腺组织病理学评分、ROS水平、NLRP3蛋白水平、肾脏组织NLRP3的mRNA水平、血清IL⁃1β和TNF⁃α含量降低（P<0.05），SOD活性升高（P<0.05）。结论：抑制ROS⁃NLRP3信号通路可以减轻大鼠AP模型及SAP模型的胰腺损伤，降低SAP模型大鼠肾脏组织炎性水平。
目的：探讨抑制ROS⁃NLRP3信号通路对急性胰腺炎大鼠的保护作用以及相关分子机制。方法：将36只雄性SD大鼠随机分为对照组（NC组）、轻症急性胰腺炎模型组（AP组）、轻症急性胰腺炎+N⁃乙酰半胱氨酸干预组（AP+NAC组）、假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎模型组（SAP组），重症急性胰腺炎+N⁃乙酰半胱氨酸干预组（SAP+NAC组），每组6只。模型构造24 h后处死大鼠。苏木精⁃伊红（HE）染色观察大鼠胰腺组织病理改变并进行病理评分；二氢乙锭（DHE）荧光探针检测大鼠胰腺腺泡细胞ROS水平；WST⁃1法检测大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）水平；免疫组化法（IHC）检测大鼠胰腺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）蛋白表达；采用qPCR检测SO组、SAP组、SAP+NAC组肾脏组织中NLRP3 mRNA水平；采用ELISA检测血清中白细胞介素1β（IL⁃1β）和肿瘤坏死因子α（TNF⁃α）的水平。结果：与对照组比较，模型组胰腺组织病理学评分、ROS水平、NLRP3蛋白水平、肾脏组织NLRP3 mRNA水平、血清IL⁃1β和TNF⁃α含量明显升高（P<0.05），模型组SOD活性降低（P<0.05）；与模型组相比，NAC干预组胰腺组织病理学评分、ROS水平、NLRP3蛋白水平、肾脏组织NLRP3的mRNA水平、血清IL⁃1β和TNF⁃α含量降低（P<0.05），SOD活性升高（P<0.05）。结论：抑制ROS⁃NLRP3信号通路可以减轻大鼠AP模型及SAP模型的胰腺损伤，降低SAP模型大鼠肾脏组织炎性水平。
2023, 29(2):87-95.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221110.001
摘要:
目的：探讨CUMS结合CRS对小鼠海马神经胶质细胞及突触可塑性相关蛋白的影响。方法：将40只小鼠随机分为正常组（n=20）、模型组（n=20）。模型组采用CUMS结合CRS的方法制备抑郁症小鼠模型，持续造模7周。采用糖水偏好实验、旷场实验及悬尾实验对造模3周、7周末小鼠进行行为学评估；实验结束后取材，酶联免疫吸附法检测小鼠海马TNF-a的含量；免疫组化法检测小鼠海马CA1区、CA3区、DG区Iba-1、GFAP MOD值；蛋白免疫印迹法检测海马Iba-1、GFAP、SYN1、PSD-95的表达；荧光定量PCR法检测海马SYN1、PSD-95 mRNA的表达。结果：造模3周末，模型组小鼠体质量、糖水偏好率、移动总距离、直立次数、中央区停留时间均低于正常组（P<0.05），悬尾不动时间长于正常组（P<0.01）；造模7周后，模型组小鼠体质量、糖水偏好率、移动总距离、直立次数、中央区停留时间、平均运动速度均低于正常组（P<0.05），悬尾不动时间均长于正常组（P<0.01）；海马TNF-a含量高于正常组（P<0.05）；海马CA1、CA3、DG区GFAP MOD值及GFAP蛋白相对表达量均低于正常组（P<0.05）；海马CA1、CA3、DG区Iba-1 MOD值及Iba-1蛋白相对表达量均高于正常组（P<0.05）；海马SYN1、PSD-95蛋白相对表达量及SYN1、PSD-95 mRNA相对表达量均低于正常组（P<0.05）。结论：经过CUMS结合CRS方法造模3周后，小鼠即可出现抑郁样行为，在造模7周后，小鼠的抑郁表现更明显。通过CUMS结合CRS方法制备的抑郁症小鼠模型可能与小鼠海马炎症水平升高，小胶质细胞过度活化、星形胶质细胞数量减少及突触可塑性下降有关。
目的：探讨CUMS结合CRS对小鼠海马神经胶质细胞及突触可塑性相关蛋白的影响。方法：将40只小鼠随机分为正常组（n=20）、模型组（n=20）。模型组采用CUMS结合CRS的方法制备抑郁症小鼠模型，持续造模7周。采用糖水偏好实验、旷场实验及悬尾实验对造模3周、7周末小鼠进行行为学评估；实验结束后取材，酶联免疫吸附法检测小鼠海马TNF-a的含量；免疫组化法检测小鼠海马CA1区、CA3区、DG区Iba-1、GFAP MOD值；蛋白免疫印迹法检测海马Iba-1、GFAP、SYN1、PSD-95的表达；荧光定量PCR法检测海马SYN1、PSD-95 mRNA的表达。结果：造模3周末，模型组小鼠体质量、糖水偏好率、移动总距离、直立次数、中央区停留时间均低于正常组（P<0.05），悬尾不动时间长于正常组（P<0.01）；造模7周后，模型组小鼠体质量、糖水偏好率、移动总距离、直立次数、中央区停留时间、平均运动速度均低于正常组（P<0.05），悬尾不动时间均长于正常组（P<0.01）；海马TNF-a含量高于正常组（P<0.05）；海马CA1、CA3、DG区GFAP MOD值及GFAP蛋白相对表达量均低于正常组（P<0.05）；海马CA1、CA3、DG区Iba-1 MOD值及Iba-1蛋白相对表达量均高于正常组（P<0.05）；海马SYN1、PSD-95蛋白相对表达量及SYN1、PSD-95 mRNA相对表达量均低于正常组（P<0.05）。结论：经过CUMS结合CRS方法造模3周后，小鼠即可出现抑郁样行为，在造模7周后，小鼠的抑郁表现更明显。通过CUMS结合CRS方法制备的抑郁症小鼠模型可能与小鼠海马炎症水平升高，小胶质细胞过度活化、星形胶质细胞数量减少及突触可塑性下降有关。
2023, 29(2):96-101.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221114.001
摘要:
目的：观察电针心包经穴对大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠神经功能缺损、缺血脑组织D-丝氨酸（D-Ser）含量、NMDAR表达的影响。方法：将36只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针心包经组、模型+D-Ser组、电针心包经+D-Ser组。采用Zea Longa法制备MCAO模型，模型+D-Ser组、电针心包经+D-Ser组在插入线栓成功后30 min予外源性D-Ser试剂（160 mg/kg i.p.）；电针心包经组、电针心包经+D-Ser组于次日行电针治疗30 min；其余组仅捆绑固定30 min。在大鼠造模成功后6 h和第2天干预后分别进行2次行为学评定，随后处死取材。应用液相色谱串联质谱法测缺血脑组织D-Ser含量、Western Blot测NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达。结果：处理前与正常组、假手术组比，造模后各组的行为学评分均升高（P<0.05）；与模型组相比，模型+D-Ser组和电针心包经+D-Ser组的行为学评分均升高（P<0.05）。处理后与模型组相比，电针心包经组差异无统计学意义（P>0.05），模型+D-Ser组和电针心包经+D-Ser组的行为学评分仍升高（P<0.05）；与模型+D-Ser组相比，电针心包经+D-Ser组行为学评分无统计学意义（P>0.05）。组内处理前后比较，除正常组和假手术组外，各组行为学评分均略升高，差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组相比，模型+D-Ser组的脑组织D-Ser含量及NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达显著增加（P<0.05）；电针心包经组的NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达下降（P<0.05）；与模型+D-Ser组相比，电针心包经+D-Ser组的D-Ser含量及NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达均下降（P<0.05）。结论：电针心包经穴可降低急性期MCAO大鼠脑组织中D-Ser含量，调控NR1、NR2A、NR2B蛋白表达下降，抑制NMDA受体活性，发挥神经保护作用。
目的：观察电针心包经穴对大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠神经功能缺损、缺血脑组织D-丝氨酸（D-Ser）含量、NMDAR表达的影响。方法：将36只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针心包经组、模型+D-Ser组、电针心包经+D-Ser组。采用Zea Longa法制备MCAO模型，模型+D-Ser组、电针心包经+D-Ser组在插入线栓成功后30 min予外源性D-Ser试剂（160 mg/kg i.p.）；电针心包经组、电针心包经+D-Ser组于次日行电针治疗30 min；其余组仅捆绑固定30 min。在大鼠造模成功后6 h和第2天干预后分别进行2次行为学评定，随后处死取材。应用液相色谱串联质谱法测缺血脑组织D-Ser含量、Western Blot测NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达。结果：处理前与正常组、假手术组比，造模后各组的行为学评分均升高（P<0.05）；与模型组相比，模型+D-Ser组和电针心包经+D-Ser组的行为学评分均升高（P<0.05）。处理后与模型组相比，电针心包经组差异无统计学意义（P>0.05），模型+D-Ser组和电针心包经+D-Ser组的行为学评分仍升高（P<0.05）；与模型+D-Ser组相比，电针心包经+D-Ser组行为学评分无统计学意义（P>0.05）。组内处理前后比较，除正常组和假手术组外，各组行为学评分均略升高，差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组相比，模型+D-Ser组的脑组织D-Ser含量及NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达显著增加（P<0.05）；电针心包经组的NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达下降（P<0.05）；与模型+D-Ser组相比，电针心包经+D-Ser组的D-Ser含量及NR1、NR2A、NR2B的蛋白表达均下降（P<0.05）。结论：电针心包经穴可降低急性期MCAO大鼠脑组织中D-Ser含量，调控NR1、NR2A、NR2B蛋白表达下降，抑制NMDA受体活性，发挥神经保护作用。
2023, 29(2):102-108.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221124.003
摘要:
目的：观察半枝莲总黄酮（TF‑SB）对高糖诱导的足细胞（MPC‑5）损伤及Smad4/PKM2/HIF‑1α信号通路的影响。方法：首先采用CCK8法分析TF‑SB对MPC‑5细胞的安全性及药效浓度。随后MPC‑5分为空白组、模型组和TF‑SB组，除空白组外，模型组和TF‑SB组采用高糖诱导建立MPC‑5细胞损伤模型，分别检测TF‑SB对MPC‑5细胞ATP、凋亡和ROS水平的影响，并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞因子（IL‑1β、TNF‑α、MCP‑1）含量，反转录聚合酶链反应（RT‑PCR）检测糖酵解基因（GLU1、PFK1和HK1）表达丰度，蛋白质印迹法（Western blot）检测各组细胞Smad4/PKM2/HIF‑1α信号通路中相关蛋白的表达水平；结果：与空白组相比，模型组MPC‑5细胞ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著下降，凋亡和ROS水平、IL‑1β、TNF‑α与MCP‑1的含量均显著增加（P<0.01）；与模型组相比，TF‑SB组ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著升高，凋亡和ROS水平、IL‑1β、TNF‑α与MCP‑1的含量均显著降低（P<0.01）。此外，与空白组相比，模型组Smad4、HIF‑1α蛋白表达及细胞核中PKM2表达显著升高，细胞质中PKM2表达显著降低（P<0.01）；与模型组相比，TF‑SB组Smad4、HIF‑1α表达及细胞核中PKM2表达显著降低，而细胞质中PKM2表达显著升高（P<0.01）；结论：TF‑SB促进MPC‑5细胞线粒体活性诱导糖酵解，进而抑制炎症的分泌，达到治疗糖尿病肾病的作用可能与通过抑制Smad4/PKM2/HIF‑1α信号通路有关。
目的：观察半枝莲总黄酮（TF‑SB）对高糖诱导的足细胞（MPC‑5）损伤及Smad4/PKM2/HIF‑1α信号通路的影响。方法：首先采用CCK8法分析TF‑SB对MPC‑5细胞的安全性及药效浓度。随后MPC‑5分为空白组、模型组和TF‑SB组，除空白组外，模型组和TF‑SB组采用高糖诱导建立MPC‑5细胞损伤模型，分别检测TF‑SB对MPC‑5细胞ATP、凋亡和ROS水平的影响，并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞因子（IL‑1β、TNF‑α、MCP‑1）含量，反转录聚合酶链反应（RT‑PCR）检测糖酵解基因（GLU1、PFK1和HK1）表达丰度，蛋白质印迹法（Western blot）检测各组细胞Smad4/PKM2/HIF‑1α信号通路中相关蛋白的表达水平；结果：与空白组相比，模型组MPC‑5细胞ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著下降，凋亡和ROS水平、IL‑1β、TNF‑α与MCP‑1的含量均显著增加（P<0.01）；与模型组相比，TF‑SB组ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著升高，凋亡和ROS水平、IL‑1β、TNF‑α与MCP‑1的含量均显著降低（P<0.01）。此外，与空白组相比，模型组Smad4、HIF‑1α蛋白表达及细胞核中PKM2表达显著升高，细胞质中PKM2表达显著降低（P<0.01）；与模型组相比，TF‑SB组Smad4、HIF‑1α表达及细胞核中PKM2表达显著降低，而细胞质中PKM2表达显著升高（P<0.01）；结论：TF‑SB促进MPC‑5细胞线粒体活性诱导糖酵解，进而抑制炎症的分泌，达到治疗糖尿病肾病的作用可能与通过抑制Smad4/PKM2/HIF‑1α信号通路有关。
2023, 29(2):109-114.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221213.002
摘要:
目的：探讨人血型抗体IgG、IgM对基因修饰猪外周血PBMC和RBC的结合和杀伤差异，为猪‑人异种肾移植临床应用的供体猪血型选择提供理论依据。方法：抽取20例健康正常人、20例终末肾病患者和20例脑死亡器官捐献者血清，并根据ABO血型分成4组（A血型：n=20；B血型：n=17；AB血型：n=7；O血型：n=16）。用流式细胞术检测4组人血清分别与O血型野生型（WT）、α1、3‑半乳糖基转移酶基因敲除（GTKO）、胞苷酸N‑乙酰神经氨酸羟化酶基因敲除（GTKO/β4GalNT2KO）、β1、4‑N‑乙酰氨基半乳糖转移酶2基因敲除（GTKO/CMAHKO）和3种基因敲除（TKO/hCD55）猪外周血单个核细胞（PBMC）和红细胞（RBC）的抗体结合或补体依赖的细胞毒性试验（CDC）。结果：A血型、B血型、AB血型和O血型人血清抗体IgM和IgG分别对WT猪PBMC，GTKO猪PBMC，GTKO/β4GalNT2KO猪PBMC，GTKO/CMAHKO猪PBMC，TKO/hCD55猪PBMC的结合和杀伤无明显差异。A血型、B血型、AB血型和O血型人血清抗体分别对WT猪RBC，GTKO猪RBC，GTKO/β4GalNT2KO猪RBC，GTKO/CMAHKO猪RBC，TKO/hCD55猪RBC的结合无明显差异。结论：O型血的TKO猪可能是目前最佳基因型供猪，且受者可能不需要考虑血型因素。
目的：探讨人血型抗体IgG、IgM对基因修饰猪外周血PBMC和RBC的结合和杀伤差异，为猪‑人异种肾移植临床应用的供体猪血型选择提供理论依据。方法：抽取20例健康正常人、20例终末肾病患者和20例脑死亡器官捐献者血清，并根据ABO血型分成4组（A血型：n=20；B血型：n=17；AB血型：n=7；O血型：n=16）。用流式细胞术检测4组人血清分别与O血型野生型（WT）、α1、3‑半乳糖基转移酶基因敲除（GTKO）、胞苷酸N‑乙酰神经氨酸羟化酶基因敲除（GTKO/β4GalNT2KO）、β1、4‑N‑乙酰氨基半乳糖转移酶2基因敲除（GTKO/CMAHKO）和3种基因敲除（TKO/hCD55）猪外周血单个核细胞（PBMC）和红细胞（RBC）的抗体结合或补体依赖的细胞毒性试验（CDC）。结果：A血型、B血型、AB血型和O血型人血清抗体IgM和IgG分别对WT猪PBMC，GTKO猪PBMC，GTKO/β4GalNT2KO猪PBMC，GTKO/CMAHKO猪PBMC，TKO/hCD55猪PBMC的结合和杀伤无明显差异。A血型、B血型、AB血型和O血型人血清抗体分别对WT猪RBC，GTKO猪RBC，GTKO/β4GalNT2KO猪RBC，GTKO/CMAHKO猪RBC，TKO/hCD55猪RBC的结合无明显差异。结论：O型血的TKO猪可能是目前最佳基因型供猪，且受者可能不需要考虑血型因素。
2023, 29(2):115-122.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221124.001
摘要:
目的：揭示缝隙连接蛋白32（connexin 32， Cx32）对肝细胞癌（heptocellular carcinoma， HCC）细胞Huh7增殖、迁移、侵袭的影响及其机制。方法：首先，利用生物信息学技术分析Cx32在癌组织与正常肝组织中的表达差异及其与HCC重要临床病理特征之间的关系；其次，在细胞水平检测Cx32的表达在4种HCC细胞株与正常肝脏上皮细胞株中的差异，构建稳定过表达Cx32的Huh7细胞株，并采用MTT法、细胞划痕实验和Transwell实验检测过表达Cx32对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响；最后，使用蛋白质免疫印迹法（western blot）和免疫荧光法（immunofluorescence， IF）检测上皮⁃间质转化（epithelial⁃mesenchymal transition， EMT）标志物表达水平的变化。结果：生信分析显示，相较于正常肝组织，Cx32 mRNA和蛋白质表达水平在HCC组织中降低，且mRNA表达水平随着HCC患者T分期、组织学分级及临床分期的进展而降低（P<0.05）。细胞实验结果示，Cx32蛋白表达在不同HCC细胞株中均呈现一定程度的下调；其中，经慢病毒感染介导Cx32稳定高表达的Huh7细胞（Cx32 OE）与空白对照（Control）组和（或）阴性对照（NC）组细胞相比，OD490值、划痕愈合率及侵袭细胞数均更低（P<0.05）。Cx32 OE组的E⁃cadherin蛋白表达水平上调，而Snail和Vimentin蛋白表达水平下调。结论：Cx32在HCC组织和细胞中均低表达，而Huh7细胞的增殖、迁移和侵袭能力可被过表达的Cx32抑制，Cx32这一效应可能与其对EMT过程的抑制有关。
目的：揭示缝隙连接蛋白32（connexin 32， Cx32）对肝细胞癌（heptocellular carcinoma， HCC）细胞Huh7增殖、迁移、侵袭的影响及其机制。方法：首先，利用生物信息学技术分析Cx32在癌组织与正常肝组织中的表达差异及其与HCC重要临床病理特征之间的关系；其次，在细胞水平检测Cx32的表达在4种HCC细胞株与正常肝脏上皮细胞株中的差异，构建稳定过表达Cx32的Huh7细胞株，并采用MTT法、细胞划痕实验和Transwell实验检测过表达Cx32对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响；最后，使用蛋白质免疫印迹法（western blot）和免疫荧光法（immunofluorescence， IF）检测上皮⁃间质转化（epithelial⁃mesenchymal transition， EMT）标志物表达水平的变化。结果：生信分析显示，相较于正常肝组织，Cx32 mRNA和蛋白质表达水平在HCC组织中降低，且mRNA表达水平随着HCC患者T分期、组织学分级及临床分期的进展而降低（P<0.05）。细胞实验结果示，Cx32蛋白表达在不同HCC细胞株中均呈现一定程度的下调；其中，经慢病毒感染介导Cx32稳定高表达的Huh7细胞（Cx32 OE）与空白对照（Control）组和（或）阴性对照（NC）组细胞相比，OD490值、划痕愈合率及侵袭细胞数均更低（P<0.05）。Cx32 OE组的E⁃cadherin蛋白表达水平上调，而Snail和Vimentin蛋白表达水平下调。结论：Cx32在HCC组织和细胞中均低表达，而Huh7细胞的增殖、迁移和侵袭能力可被过表达的Cx32抑制，Cx32这一效应可能与其对EMT过程的抑制有关。
2023, 29(2):123-128.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221206.001
摘要:
目的：探究METTL14是否通过调控pri‑miR‑141的m6A修饰参与调控成纤维细胞的增殖和炎症因子分泌。方法：使用METTL14过表达慢病毒转染MRC‑5细胞，采用qPCR和western blot检测METTL14和ZEB1的表达量；采用CCK‑8和流式细胞术检测METTL14对MRC‑5增殖和凋亡的影响；IL‑2，IL6和TNF‑α的ELISA试剂盒检测METTL14对MRC‑5分泌炎症因子的影响；采用meRIP检测pri‑miR‑141上的m6A修饰位点，RIP检测pri‑miR‑141与METTL14的结合情况。结果：在MRC‑5细胞中成功过表达METTL14基因；METTL14高表达促进MRC‑5细胞增殖，抑制其凋亡，并促进MRC‑5细胞分泌炎症因子；pri‑miR‑141上存在m6A修饰位点，且pri‑miR‑141能够和METTL14直接结合；METTL14高表达增加miR‑141的表达量，并抑制ZEB1 mRNA与蛋白表达。结论：METTL14通过增加pri‑miR‑141的m6A修饰位点促进miR‑141的表达，抑制ZEB1从而促进成纤维细胞的增殖和炎症因子的分泌。
目的：探究METTL14是否通过调控pri‑miR‑141的m6A修饰参与调控成纤维细胞的增殖和炎症因子分泌。方法：使用METTL14过表达慢病毒转染MRC‑5细胞，采用qPCR和western blot检测METTL14和ZEB1的表达量；采用CCK‑8和流式细胞术检测METTL14对MRC‑5增殖和凋亡的影响；IL‑2，IL6和TNF‑α的ELISA试剂盒检测METTL14对MRC‑5分泌炎症因子的影响；采用meRIP检测pri‑miR‑141上的m6A修饰位点，RIP检测pri‑miR‑141与METTL14的结合情况。结果：在MRC‑5细胞中成功过表达METTL14基因；METTL14高表达促进MRC‑5细胞增殖，抑制其凋亡，并促进MRC‑5细胞分泌炎症因子；pri‑miR‑141上存在m6A修饰位点，且pri‑miR‑141能够和METTL14直接结合；METTL14高表达增加miR‑141的表达量，并抑制ZEB1 mRNA与蛋白表达。结论：METTL14通过增加pri‑miR‑141的m6A修饰位点促进miR‑141的表达，抑制ZEB1从而促进成纤维细胞的增殖和炎症因子的分泌。
2023, 29(2):129-136.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20221124.002
摘要:
目的：通过加权基因共表达网络分析鉴定肝细胞癌（hepatocellular carcinoma， HCC）临床特征密切相关模块基因，为临床早期诊断及治疗提供参考。方法：从GEO数据库下载GSE84598芯片数据，综合加权基因共表达网络分析提取与HCC临床特征密切相关的模块基因。通过最大集团中心性（maximal clique centrality， MCC）算法对蛋白相互作用网络分析，鉴定出枢纽基因；最后通过TCGA数据库验证枢纽基因的表达情况、Kaplan‑Meier Plotter在线数据库评估枢纽基因与HCC患者的预后关系。结果：通过对比HCC组织样本与正常肝组织样本的基因表达数据，共获得6 262个差异表达基因，其中上调2 207个，下调4 055个。运用加权基因共表达网络分析鉴定出关键模块的120个基因；通过与差异表达基因取交集，得到候选枢纽基因115个。富集分析结果显示，候选枢纽基因与细胞有丝分裂、p53信号通路等密切相关。进一步运用MCC算法对115个候选枢纽基因的蛋白相互作用网络进行分析，鉴定出5个枢纽基因，即NUF2、RRM2、UBE2C、CDC20和MAD2L1。通过TCGA数据库对枢纽基因的验证，结果发现，与正常肝组织相比，在HCC组织中5个枢纽基因均明显上调；而且生存分析显示枢纽基因的高表达与HCC患者的不良预后密切相关。结论：本研究通过结合多个数据库鉴定出了5个枢纽基因，为HCC的临床诊断及治疗提供方向。
目的：通过加权基因共表达网络分析鉴定肝细胞癌（hepatocellular carcinoma， HCC）临床特征密切相关模块基因，为临床早期诊断及治疗提供参考。方法：从GEO数据库下载GSE84598芯片数据，综合加权基因共表达网络分析提取与HCC临床特征密切相关的模块基因。通过最大集团中心性（maximal clique centrality， MCC）算法对蛋白相互作用网络分析，鉴定出枢纽基因；最后通过TCGA数据库验证枢纽基因的表达情况、Kaplan‑Meier Plotter在线数据库评估枢纽基因与HCC患者的预后关系。结果：通过对比HCC组织样本与正常肝组织样本的基因表达数据，共获得6 262个差异表达基因，其中上调2 207个，下调4 055个。运用加权基因共表达网络分析鉴定出关键模块的120个基因；通过与差异表达基因取交集，得到候选枢纽基因115个。富集分析结果显示，候选枢纽基因与细胞有丝分裂、p53信号通路等密切相关。进一步运用MCC算法对115个候选枢纽基因的蛋白相互作用网络进行分析，鉴定出5个枢纽基因，即NUF2、RRM2、UBE2C、CDC20和MAD2L1。通过TCGA数据库对枢纽基因的验证，结果发现，与正常肝组织相比，在HCC组织中5个枢纽基因均明显上调；而且生存分析显示枢纽基因的高表达与HCC患者的不良预后密切相关。结论：本研究通过结合多个数据库鉴定出了5个枢纽基因，为HCC的临床诊断及治疗提供方向。
2023, 29(2):137-145.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20210712.001
摘要:
目的：系统评价中药治疗慢性咳嗽的临床疗效及安全性，为临床提供指导。方法：计算机检索中国知网（CNKI）、万方（WanFang Data）、维普（VIP）、中国生物医学文献数据库（CBM）、PubMed、Web of Science、Cochrane Library数据库，收集中药治疗慢性咳嗽（包括UACS/PNDS、CVA、EB、AC、GERD及其他类型的慢性咳嗽）的中英文随机对照试验（randomized controlled trials，RCTs），并由2位研究人员分别检索自建库至2021年5月前公开发表的研究； 运用Cochrane偏倚风险工具对纳入文献进行质量评价，采用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果：共纳入26篇随机对照实验，包括2 820例研究对象，其中中药治疗组1 420例，对照组1 400例，组间基线情况一致，具有可比性。Meta分析结果示：与使用西药治疗相比，中药可提高治疗慢性咳嗽的有效率［RR=1.20， 95% CI（1.16，1.25）， P<0.000 01］， 减轻咳嗽证候积分［SMD=-0.83， 95% CI（-1.21，-0.44）］， 改善生活质量评分［MD=-2.18，95% CI（1.63，2.74），P<0.000 01］；同时在改善肺功能，减少咳嗽缓解时间方面优于对照组，在安全性方面，共有5篇文献24例患者出现了不良反应，但症状较轻，能较快缓解，且对照组与实验组不良反应方面无明显差别，安全性良好。结论：中药治疗明显提高咳嗽的治愈率、降低咳嗽积分、改善全身症状、缓解心理焦虑、改善肺功能、快速改善咳嗽症状，安全性良好。
目的：系统评价中药治疗慢性咳嗽的临床疗效及安全性，为临床提供指导。方法：计算机检索中国知网（CNKI）、万方（WanFang Data）、维普（VIP）、中国生物医学文献数据库（CBM）、PubMed、Web of Science、Cochrane Library数据库，收集中药治疗慢性咳嗽（包括UACS/PNDS、CVA、EB、AC、GERD及其他类型的慢性咳嗽）的中英文随机对照试验（randomized controlled trials，RCTs），并由2位研究人员分别检索自建库至2021年5月前公开发表的研究； 运用Cochrane偏倚风险工具对纳入文献进行质量评价，采用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果：共纳入26篇随机对照实验，包括2 820例研究对象，其中中药治疗组1 420例，对照组1 400例，组间基线情况一致，具有可比性。Meta分析结果示：与使用西药治疗相比，中药可提高治疗慢性咳嗽的有效率［RR=1.20， 95% CI（1.16，1.25）， P<0.000 01］， 减轻咳嗽证候积分［SMD=-0.83， 95% CI（-1.21，-0.44）］， 改善生活质量评分［MD=-2.18，95% CI（1.63，2.74），P<0.000 01］；同时在改善肺功能，减少咳嗽缓解时间方面优于对照组，在安全性方面，共有5篇文献24例患者出现了不良反应，但症状较轻，能较快缓解，且对照组与实验组不良反应方面无明显差别，安全性良好。结论：中药治疗明显提高咳嗽的治愈率、降低咳嗽积分、改善全身症状、缓解心理焦虑、改善肺功能、快速改善咳嗽症状，安全性良好。
2023, 29(2):146-152.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20210616.003
摘要:
铁死亡受基因调控，参与缺血再灌注损伤、脑卒中、肿瘤等疾病的生理和病理过程，致病机制尚未明确。已知调控p53基因可诱导内皮细胞和肿瘤细胞铁死亡。而抑制铁死亡使GPX4正常发挥作用，阻断细胞膜上脂质氧化，减少活性氧自由基（ROS）积累，保护正常细胞。鉴于铁死亡的多反应性，可能有助于杀死癌细胞，可能会损伤正常细胞，所以调节性铁死亡敏感相关基因及触发机制亟待阐明。本文主要综述目前已知的GPX4、FSP1、SLC7A11、P53等调节性铁死亡敏感相关基因功能机制，以期为铁死亡研究深度剖析及重大疾病药物靶向选择提供参考。
铁死亡受基因调控，参与缺血再灌注损伤、脑卒中、肿瘤等疾病的生理和病理过程，致病机制尚未明确。已知调控p53基因可诱导内皮细胞和肿瘤细胞铁死亡。而抑制铁死亡使GPX4正常发挥作用，阻断细胞膜上脂质氧化，减少活性氧自由基（ROS）积累，保护正常细胞。鉴于铁死亡的多反应性，可能有助于杀死癌细胞，可能会损伤正常细胞，所以调节性铁死亡敏感相关基因及触发机制亟待阐明。本文主要综述目前已知的GPX4、FSP1、SLC7A11、P53等调节性铁死亡敏感相关基因功能机制，以期为铁死亡研究深度剖析及重大疾病药物靶向选择提供参考。
2023, 29(2):153-160.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20210621.002
摘要:
葛根作为中国传统中药，在历代本草著作中广泛记载。现代研究发现，其主要化学成分有异黄酮类、三萜类、皂苷类等，具有解热、抗炎、抗感染、降血压、降血糖、降血脂、改善生殖功能等药理作用。临床以中药复方的形式应用于糖尿病疾病、胃肠道疾病、心血管疾病等治疗中。本文对近5年葛根相关文章进行总结，重点围绕其药理作用以及复方的临床应用进行综述，为其进一步开发利用提供参考。
葛根作为中国传统中药，在历代本草著作中广泛记载。现代研究发现，其主要化学成分有异黄酮类、三萜类、皂苷类等，具有解热、抗炎、抗感染、降血压、降血糖、降血脂、改善生殖功能等药理作用。临床以中药复方的形式应用于糖尿病疾病、胃肠道疾病、心血管疾病等治疗中。本文对近5年葛根相关文章进行总结，重点围绕其药理作用以及复方的临床应用进行综述，为其进一步开发利用提供参考。
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