Journal of Hainan Medical University(中文版)
2026年第32卷第10期文章目次
2026, 32(10):721-729.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250530.001
摘要:
目的:探究吡非尼酮（pirfenidone，PFD）对三阴性乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和侵袭能力影响的机制。 方法:培养三阴性乳腺癌4T1细胞株，将不同浓度PFD（2、4、6、8 mmol/L）处理4T1细胞作为药物处理组，未加PFD的处理4T1细胞为对照组。Western blot检测芳胺N‑乙酰转移酶1（arylamine N‑acetyltransferase 1，NAT1）蛋白的表达；CCK‑8实验和克隆形成实验检测PFD对4T1细胞增殖能力的影响；划痕实验和Transwell迁移实验检测PFD对4T1细胞迁移能力的影响；Transwell侵袭实验检测PFD对4T1细胞侵袭能力的影响；分子对接验证PFD与NAT1之间的相互作用。 结果:与对照组相比，PFD在8 mmol/L浓度时明显抑制NAT1蛋白的表达（P<0.000 1）；与对照组相比，经2、4、6、8 mmol/L PFD处理的4T1细胞增殖、迁移、侵袭能力逐渐减弱，具有浓度依赖性；其中，PFD浓度为8 mmol/L时明显抑制了4T1细胞的增殖、迁移与侵袭能力（P<0.001）；此外，分子对接显示，PFD与NAT1之间存在氢键及疏水相互作用。 结论:8 mmol/LPFD通过抑制NAT1蛋白表达降低三阴性乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和侵袭能力。
目的:探究吡非尼酮（pirfenidone，PFD）对三阴性乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和侵袭能力影响的机制。 方法:培养三阴性乳腺癌4T1细胞株，将不同浓度PFD（2、4、6、8 mmol/L）处理4T1细胞作为药物处理组，未加PFD的处理4T1细胞为对照组。Western blot检测芳胺N‑乙酰转移酶1（arylamine N‑acetyltransferase 1，NAT1）蛋白的表达；CCK‑8实验和克隆形成实验检测PFD对4T1细胞增殖能力的影响；划痕实验和Transwell迁移实验检测PFD对4T1细胞迁移能力的影响；Transwell侵袭实验检测PFD对4T1细胞侵袭能力的影响；分子对接验证PFD与NAT1之间的相互作用。 结果:与对照组相比，PFD在8 mmol/L浓度时明显抑制NAT1蛋白的表达（P<0.000 1）；与对照组相比，经2、4、6、8 mmol/L PFD处理的4T1细胞增殖、迁移、侵袭能力逐渐减弱，具有浓度依赖性；其中，PFD浓度为8 mmol/L时明显抑制了4T1细胞的增殖、迁移与侵袭能力（P<0.001）；此外，分子对接显示，PFD与NAT1之间存在氢键及疏水相互作用。 结论:8 mmol/LPFD通过抑制NAT1蛋白表达降低三阴性乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和侵袭能力。
2026, 32(10):730-738.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250522.001
摘要:
目的:探讨XKR8基因在噪声性耳聋（noise‑induced hearing loss，NIHL）中对其听力的影响。 方法:选用6~8周龄XKR8纯合子小鼠（XKR8‑/‑，XKR8 KO）和野生型（Wild‑type，WT）进行实验，并且先通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）、琼脂糖凝胶电泳和蛋白免疫印迹实验（Western blot）来确定基因敲除小鼠的基因型。将小鼠分为未进行噪声暴露的WT组和XKR8组与进行噪声暴露的WT‑110 dB组和XKR8‑110 dB组。将XKR8 KO小鼠和WT小鼠暴露于范围为8~20 kHz、强度为110 dB SPL的宽带噪声中持续2 h，在暴噪后的1、3、7、14 d时分别进行听觉脑干反应（auditory brainstem response，ABR）测听，在第14天ABR测听结束后将小鼠处死并取耳蜗进行铺片和解剖，通过免疫荧光染色，检测外毛细胞（outer hair cell ，OHC）的形态和丢失数量。 结果:基因型鉴定后，选用XKR8 KO（XKR8‑/‑）小鼠和WT小鼠进行实验。暴露噪声前，ABR测听结果显示XKR8 KO和WT小鼠的基础听力差异无统计学意义（P>0.05）。暴露噪声后第1天，ABR结果提示XKR8‑110 dB组和WT‑110 dB组的听阈达到85 dB左右；在噪声暴露后第3、7、14天，XKR8‑110 dB组小鼠的听力阈值较WT‑110 dB组小鼠低（P<0.05）。OHC免疫荧光染色显示，XKR8‑110 dB组和WT‑110 dB 2组在顶回（Apex）和中回（Middle）前段差异无统计学意义（P>0.05），而在Middle中后段和底回（Base），XKR8‑110 dB组OHC的丢失较WT‑110 dB组少（P<0.05）。 结论:在噪声暴露后，XKR8 KO小鼠的听力水平优于WT小鼠，减轻了由噪声诱导的听力损伤。免疫荧光染色结果显示，XKR8 KO小鼠的OHC的丢失少于WT小鼠，减轻了由噪声诱导的OHC损伤。
目的:探讨XKR8基因在噪声性耳聋（noise‑induced hearing loss，NIHL）中对其听力的影响。 方法:选用6~8周龄XKR8纯合子小鼠（XKR8‑/‑，XKR8 KO）和野生型（Wild‑type，WT）进行实验，并且先通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）、琼脂糖凝胶电泳和蛋白免疫印迹实验（Western blot）来确定基因敲除小鼠的基因型。将小鼠分为未进行噪声暴露的WT组和XKR8组与进行噪声暴露的WT‑110 dB组和XKR8‑110 dB组。将XKR8 KO小鼠和WT小鼠暴露于范围为8~20 kHz、强度为110 dB SPL的宽带噪声中持续2 h，在暴噪后的1、3、7、14 d时分别进行听觉脑干反应（auditory brainstem response，ABR）测听，在第14天ABR测听结束后将小鼠处死并取耳蜗进行铺片和解剖，通过免疫荧光染色，检测外毛细胞（outer hair cell ，OHC）的形态和丢失数量。 结果:基因型鉴定后，选用XKR8 KO（XKR8‑/‑）小鼠和WT小鼠进行实验。暴露噪声前，ABR测听结果显示XKR8 KO和WT小鼠的基础听力差异无统计学意义（P>0.05）。暴露噪声后第1天，ABR结果提示XKR8‑110 dB组和WT‑110 dB组的听阈达到85 dB左右；在噪声暴露后第3、7、14天，XKR8‑110 dB组小鼠的听力阈值较WT‑110 dB组小鼠低（P<0.05）。OHC免疫荧光染色显示，XKR8‑110 dB组和WT‑110 dB 2组在顶回（Apex）和中回（Middle）前段差异无统计学意义（P>0.05），而在Middle中后段和底回（Base），XKR8‑110 dB组OHC的丢失较WT‑110 dB组少（P<0.05）。 结论:在噪声暴露后，XKR8 KO小鼠的听力水平优于WT小鼠，减轻了由噪声诱导的听力损伤。免疫荧光染色结果显示，XKR8 KO小鼠的OHC的丢失少于WT小鼠，减轻了由噪声诱导的OHC损伤。
2026, 32(10):739-750.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250528.002
摘要:
目的:以STAT5/RIPK3/MLKL通路为切入点，探讨阐明益肺宣肺降浊方对血管性痴呆（vascular dementia，VaD）模型大鼠坏死性凋亡的影响及其作用机制。 方法:选取50只SD雄性大鼠，其中40只采用双侧颈总动脉永久性结扎（2VO）法建立VaD模型，将大鼠随机分为模型组和益肺宣肺降浊方低剂量组、高剂量组及盐酸多奈哌齐组，另选取10只大鼠作为假手术组（SHAM组）。采用Morris水迷宫实验检测评估大鼠学习记忆行为；H&E染色和尼氏染色分析大鼠海马组织病理形态；免疫荧光染色法观察各组大鼠海马组织STAT5、p⁃RIPK3阳性表达；ELISA法检测各组大鼠血清中IL⁃10、TNF⁃α因子水平；Real⁃time PCR检测STAT5、FADD、iNOS和HO⁃1 mRNA水平；Western blot检测海马组织STAT5、p⁃RIPK3/RIPK3、p⁃MLKL/MLKL、FADD蛋白表达。 结果:与假手术组相比，模型组大鼠海马组织呈现明显病理学改变，其逃避潜伏期明显延长（P<0.05），穿越平台的次数明显减少（P<0.05），提示大鼠空间学习记忆功能受损；大鼠血清中TNF⁃α水平升高，IL⁃10水平下降；海马组织中STAT5、p⁃RIPK3阳性表达量升高；海马组织中STAT5、FADD、iNOS和HO⁃1 mRNA表达升高，且STAT5、p⁃RIPK3/RIPK3、p⁃MLKL/MLKL、FADD蛋白表达量增加。与模型组相比，益肺宣肺降浊方明显减轻了VaD大鼠海马组织损伤并改善其学习记忆能力，调节血清中IL⁃10、TNF⁃α因子水平，降低海马组织中STAT5、FADD、iNOS、HO⁃1mRNA水平和STAT5、p⁃RIPK3阳性表达量，抑制STAT5、p⁃RIPK3/RIPK3、p⁃MLKL/MLKL、FADD蛋白表达（P<0.05）。 结论:益肺宣肺降浊方通过抑制VaD大鼠坏死性凋亡途径减轻其病理表现和炎症反应，从而改善其记忆学习能力。
目的:以STAT5/RIPK3/MLKL通路为切入点，探讨阐明益肺宣肺降浊方对血管性痴呆（vascular dementia，VaD）模型大鼠坏死性凋亡的影响及其作用机制。 方法:选取50只SD雄性大鼠，其中40只采用双侧颈总动脉永久性结扎（2VO）法建立VaD模型，将大鼠随机分为模型组和益肺宣肺降浊方低剂量组、高剂量组及盐酸多奈哌齐组，另选取10只大鼠作为假手术组（SHAM组）。采用Morris水迷宫实验检测评估大鼠学习记忆行为；H&E染色和尼氏染色分析大鼠海马组织病理形态；免疫荧光染色法观察各组大鼠海马组织STAT5、p⁃RIPK3阳性表达；ELISA法检测各组大鼠血清中IL⁃10、TNF⁃α因子水平；Real⁃time PCR检测STAT5、FADD、iNOS和HO⁃1 mRNA水平；Western blot检测海马组织STAT5、p⁃RIPK3/RIPK3、p⁃MLKL/MLKL、FADD蛋白表达。 结果:与假手术组相比，模型组大鼠海马组织呈现明显病理学改变，其逃避潜伏期明显延长（P<0.05），穿越平台的次数明显减少（P<0.05），提示大鼠空间学习记忆功能受损；大鼠血清中TNF⁃α水平升高，IL⁃10水平下降；海马组织中STAT5、p⁃RIPK3阳性表达量升高；海马组织中STAT5、FADD、iNOS和HO⁃1 mRNA表达升高，且STAT5、p⁃RIPK3/RIPK3、p⁃MLKL/MLKL、FADD蛋白表达量增加。与模型组相比，益肺宣肺降浊方明显减轻了VaD大鼠海马组织损伤并改善其学习记忆能力，调节血清中IL⁃10、TNF⁃α因子水平，降低海马组织中STAT5、FADD、iNOS、HO⁃1mRNA水平和STAT5、p⁃RIPK3阳性表达量，抑制STAT5、p⁃RIPK3/RIPK3、p⁃MLKL/MLKL、FADD蛋白表达（P<0.05）。 结论:益肺宣肺降浊方通过抑制VaD大鼠坏死性凋亡途径减轻其病理表现和炎症反应，从而改善其记忆学习能力。
2026, 32(10):751-758.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250408.004
摘要:
目的:探究雪上一枝蒿（Aconitum brachypodum Diels）总生物碱及其三种生物碱类单体对MH7A细胞的毒性及其体外抗炎活性。 方法:选用MH7A细胞作为实验对象，采用CCK⁃8法测定雪上一枝蒿总生物碱及其三种生物碱类单体对MH7A细胞存活率的影响；细胞划痕法检测雪上一枝蒿总生物碱及其三种生物碱类单体对MH7A细胞迁移的影响；通过肿瘤坏死因子⁃α（TNF⁃α）刺激MH7A细胞建立体外类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）细胞模型，ELISA法测定细胞上清中炎症因子前列腺素E2（PGE⁃2）、白细胞介素⁃6（IL⁃6）、白细胞介素⁃1β（IL⁃1β）的表达情况。 结果:根据CCK⁃8法检测得各药物最大无细胞毒性药物浓度分别为：雪上一枝蒿甲素1 140 μg/mL、雪上一枝蒿乙素750 μg/mL、雪上一枝蒿总生物碱纯化物100 μg/mL、乌头碱50 μg/mL；各给药组对MH7A细胞迁移抑制作用强弱顺序为：乌头碱>雪上一枝蒿乙素>雪上一枝蒿总生物碱纯化物>雪上一枝蒿甲素；雪上一枝蒿总生物碱纯化物、雪上一枝蒿甲素、雪上一枝蒿乙素、乌头碱能抑制TNF⁃α诱导后的MH7A细胞PGE2、IL⁃6、IL⁃1β的生成量。 结论:雪上一枝蒿总生物碱纯化物、雪上一枝蒿甲素、雪上一枝蒿乙素、乌头碱均可呈浓度依赖性地抑制MH7A细胞分泌细胞因子PGE2、IL⁃6、IL⁃1β。
目的:探究雪上一枝蒿（Aconitum brachypodum Diels）总生物碱及其三种生物碱类单体对MH7A细胞的毒性及其体外抗炎活性。 方法:选用MH7A细胞作为实验对象，采用CCK⁃8法测定雪上一枝蒿总生物碱及其三种生物碱类单体对MH7A细胞存活率的影响；细胞划痕法检测雪上一枝蒿总生物碱及其三种生物碱类单体对MH7A细胞迁移的影响；通过肿瘤坏死因子⁃α（TNF⁃α）刺激MH7A细胞建立体外类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）细胞模型，ELISA法测定细胞上清中炎症因子前列腺素E2（PGE⁃2）、白细胞介素⁃6（IL⁃6）、白细胞介素⁃1β（IL⁃1β）的表达情况。 结果:根据CCK⁃8法检测得各药物最大无细胞毒性药物浓度分别为：雪上一枝蒿甲素1 140 μg/mL、雪上一枝蒿乙素750 μg/mL、雪上一枝蒿总生物碱纯化物100 μg/mL、乌头碱50 μg/mL；各给药组对MH7A细胞迁移抑制作用强弱顺序为：乌头碱>雪上一枝蒿乙素>雪上一枝蒿总生物碱纯化物>雪上一枝蒿甲素；雪上一枝蒿总生物碱纯化物、雪上一枝蒿甲素、雪上一枝蒿乙素、乌头碱能抑制TNF⁃α诱导后的MH7A细胞PGE2、IL⁃6、IL⁃1β的生成量。 结论:雪上一枝蒿总生物碱纯化物、雪上一枝蒿甲素、雪上一枝蒿乙素、乌头碱均可呈浓度依赖性地抑制MH7A细胞分泌细胞因子PGE2、IL⁃6、IL⁃1β。
2026, 32(10):759-768.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250324.001
摘要:
目的:探讨Gasdermin D（GSDMD）基因敲除对慢加急性肝衰竭（acute⁃on⁃chronic liver failure，ACLF）小鼠肝组织坏死性凋亡通路RIPK1、RIPK3、MLKL、p⁃MLKL表达的影响。 方法:通过生物信息学分析焦亡、坏死性凋亡通路及相关基因在不同慢性肝病中的表达情况；对焦亡执行蛋白GSDMD与坏死性凋亡关键蛋白MLKL等构建蛋白质⁃蛋白质相互作用（PPI）网络；对GSDMD与坏死性凋亡通路及其效应蛋白MLKL进行线性拟合相关性分析。通过四氯化碳（Carbon tetrachloride，CCl4）联合肺炎克雷伯菌（Klebsiella Pneumoniae，K.P.）构建ACLF小鼠模型，设立野生型（wild type，WT）空白对照组、4 w/8 w CCl4肝损伤及ACLF组，GSDMD基因敲除（knockout，KO）空白对照组及ACLF组，ELISA检测ALT/AST、IL⁃33/IL⁃1α水平；H&E染色观察小鼠肝组织病理学；实时荧光定量PCR、Western blot检测小鼠肝组织焦亡相关基因及蛋白Caspase⁃1/11、GSDMD⁃FL/N、IL⁃18/1β及坏死性凋亡关键蛋白RIPK1/3、MLKL、p⁃MLKL的表达；免疫荧光检测肝组织GSDMD、MLKL荧光强度。 结果:生信分析示焦亡与坏死性凋亡通路相关基因在ACLF中表达明显上调，GSDMD与坏死性凋亡通路及MLKL在ACLF中呈正相关。体内实验显示，与空白对照相比，ACLF小鼠肝组织焦亡与坏死性凋亡相关蛋白表达均上调（P<0.01），免疫荧光示GSDMD荧光强度明显增加（P<0.001）。与野生型ACLF组相比，GSDMD基因敲除ACLF组小鼠生存时间延长；ALT、IL⁃33等水平降低（P<0.05）；H&E染色示增生纤维组织较野生型ACLF组减少，肝细胞少量坏死，部分有炎症细胞浸润；RIPK1/3、MLKL、p⁃MLKL表达均明显下调（P<0.05）；肝细胞MLKL免疫荧光强度明显减少（P<0.001）。 结论:细胞焦亡与坏死性凋亡是ACLF重要的两种细胞死亡方式，敲除焦亡执行蛋白GSDMD通过抑制坏死性凋亡通路RIPK1/3、MLKL、p⁃MLKL的表达，减少IL⁃33、IL⁃1α炎性细胞因子的释放，减少肝细胞死亡并减轻肝组织炎症从而改善ACLF小鼠肝损伤程度，提高小鼠存活率。
目的:探讨Gasdermin D（GSDMD）基因敲除对慢加急性肝衰竭（acute⁃on⁃chronic liver failure，ACLF）小鼠肝组织坏死性凋亡通路RIPK1、RIPK3、MLKL、p⁃MLKL表达的影响。 方法:通过生物信息学分析焦亡、坏死性凋亡通路及相关基因在不同慢性肝病中的表达情况；对焦亡执行蛋白GSDMD与坏死性凋亡关键蛋白MLKL等构建蛋白质⁃蛋白质相互作用（PPI）网络；对GSDMD与坏死性凋亡通路及其效应蛋白MLKL进行线性拟合相关性分析。通过四氯化碳（Carbon tetrachloride，CCl4）联合肺炎克雷伯菌（Klebsiella Pneumoniae，K.P.）构建ACLF小鼠模型，设立野生型（wild type，WT）空白对照组、4 w/8 w CCl4肝损伤及ACLF组，GSDMD基因敲除（knockout，KO）空白对照组及ACLF组，ELISA检测ALT/AST、IL⁃33/IL⁃1α水平；H&E染色观察小鼠肝组织病理学；实时荧光定量PCR、Western blot检测小鼠肝组织焦亡相关基因及蛋白Caspase⁃1/11、GSDMD⁃FL/N、IL⁃18/1β及坏死性凋亡关键蛋白RIPK1/3、MLKL、p⁃MLKL的表达；免疫荧光检测肝组织GSDMD、MLKL荧光强度。 结果:生信分析示焦亡与坏死性凋亡通路相关基因在ACLF中表达明显上调，GSDMD与坏死性凋亡通路及MLKL在ACLF中呈正相关。体内实验显示，与空白对照相比，ACLF小鼠肝组织焦亡与坏死性凋亡相关蛋白表达均上调（P<0.01），免疫荧光示GSDMD荧光强度明显增加（P<0.001）。与野生型ACLF组相比，GSDMD基因敲除ACLF组小鼠生存时间延长；ALT、IL⁃33等水平降低（P<0.05）；H&E染色示增生纤维组织较野生型ACLF组减少，肝细胞少量坏死，部分有炎症细胞浸润；RIPK1/3、MLKL、p⁃MLKL表达均明显下调（P<0.05）；肝细胞MLKL免疫荧光强度明显减少（P<0.001）。 结论:细胞焦亡与坏死性凋亡是ACLF重要的两种细胞死亡方式，敲除焦亡执行蛋白GSDMD通过抑制坏死性凋亡通路RIPK1/3、MLKL、p⁃MLKL的表达，减少IL⁃33、IL⁃1α炎性细胞因子的释放，减少肝细胞死亡并减轻肝组织炎症从而改善ACLF小鼠肝损伤程度，提高小鼠存活率。
2026, 32(10):769-784.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250616.005
摘要:
目的:利用蛋白组学方法筛选生长受限胎儿羊水差异表达的蛋白，筛选潜在的可诊断胎儿生长受限的生物标志物。 方法:对晚孕期的29例羊水样本进行蛋白组学分析和验证。（1）18例羊水样本（包括8例严重生长受限胎儿、5例小于胎龄胎儿及5例正常胎儿）通过基于质谱的4D⁃Label⁃free Quantification（4D⁃LFQ）定量蛋白质组学技术鉴定蛋白并进行定量，当P<0.05时，以差异表达量变化超过1.5作为明显上调的变化阈值，小于1/1.5作为明显下调的变化阈值，分别筛选严重生长受限胎儿对比正常胎儿、小于胎龄胎儿对比正常胎儿、严重生长受限胎儿对比小于胎龄胎儿的差异表达蛋白，对差异蛋白进行功能、通路富集分析及蛋白质⁃蛋白质相互作用网络。以正常胎儿、小于胎龄胎儿、严重生长受限胎儿的顺序，进行蛋白表达模式聚类分析，并对聚类蛋白进行功能、通路富集分析。（2）基于质谱的靶向蛋白质组定量技术（PRM）验证15例羊水（包括严重生长受限胎儿、小于胎龄胎儿、正常胎儿各5例，18例中3例样本量不足）的17种差异蛋白。（3）用酶联免疫吸附法（ELISA）检测10例严重生长受限胎儿及10例正常胎儿羊水中铁死亡通路关键蛋白TFRC和GPX4浓度并比较差异（部分样本量不足以进行后续实验，新纳入11例研究病例，包括4例严重生长受限胎儿和7例正常胎儿）。 结果:（1）通过特异性肽段解析的蛋白总数为3 047，可定量比较的蛋白数为2 957。将严重胎儿生长受限，小于胎龄胎儿2组病例组及正常对照组两两比较，严重胎儿生长受限组对比正常对照组鉴定到235个差异蛋白（包括137个上调蛋白和98个下调蛋白），小于胎龄胎儿组对比正常对照组鉴定到197个差异蛋白（包括111个上调蛋白和86个下调蛋白），严重胎儿生长受限组对比小于胎龄胎儿组鉴定到140个差异蛋白（68个上调蛋白和72个下调蛋白）。（2）基于质谱的靶向蛋白质组定量技术 （parallel reaction monitoring，PRM）验证17种显著差异蛋白，其中TPP1、PRL、CRP、EDN3、LAMA2、ERP29、PDIA3、IGFBPL1、CHRD、CTNNBIP1、ALPL、CTSL、ACE、CEL、AHSP共15个蛋白在病例组与对照组的比较中表达趋势与定量结果完全一致。（3）酶联免疫法检测10例严重生长受限胎儿及10例正常胎儿羊水的TFRC、GPX4浓度并比较差异，TFRC在严重生长受限胎儿组明显上调，GPX4在两组间差异无统计学意义。 结论:对生长受限胎儿的羊水用基于质谱的4D⁃Label⁃free Quantification（4D⁃LFQ）定量蛋白质组学进行研究，严重生长受限胎儿组对比正常组共鉴定到差异蛋白235个（137个上调，98个下调），小于胎龄胎儿组对比正常胎儿共鉴定到197个差异蛋白（111个上调，86个下调）。经基于质谱的靶向蛋白质组定量技术（PRM）验证显著差异蛋白，ELISA验证铁死亡通路相关蛋白，蛋白TPP1、PRL、CRP、EDN3、LAMA2、ERP29、PDIA3、IGFBPL1、CHRD、CTNNBIP1、ALPL、CTSL、ACE、CEL、AHSP、TFRC有望成为胎儿生长受限的生物标志物。
目的:利用蛋白组学方法筛选生长受限胎儿羊水差异表达的蛋白，筛选潜在的可诊断胎儿生长受限的生物标志物。 方法:对晚孕期的29例羊水样本进行蛋白组学分析和验证。（1）18例羊水样本（包括8例严重生长受限胎儿、5例小于胎龄胎儿及5例正常胎儿）通过基于质谱的4D⁃Label⁃free Quantification（4D⁃LFQ）定量蛋白质组学技术鉴定蛋白并进行定量，当P<0.05时，以差异表达量变化超过1.5作为明显上调的变化阈值，小于1/1.5作为明显下调的变化阈值，分别筛选严重生长受限胎儿对比正常胎儿、小于胎龄胎儿对比正常胎儿、严重生长受限胎儿对比小于胎龄胎儿的差异表达蛋白，对差异蛋白进行功能、通路富集分析及蛋白质⁃蛋白质相互作用网络。以正常胎儿、小于胎龄胎儿、严重生长受限胎儿的顺序，进行蛋白表达模式聚类分析，并对聚类蛋白进行功能、通路富集分析。（2）基于质谱的靶向蛋白质组定量技术（PRM）验证15例羊水（包括严重生长受限胎儿、小于胎龄胎儿、正常胎儿各5例，18例中3例样本量不足）的17种差异蛋白。（3）用酶联免疫吸附法（ELISA）检测10例严重生长受限胎儿及10例正常胎儿羊水中铁死亡通路关键蛋白TFRC和GPX4浓度并比较差异（部分样本量不足以进行后续实验，新纳入11例研究病例，包括4例严重生长受限胎儿和7例正常胎儿）。 结果:（1）通过特异性肽段解析的蛋白总数为3 047，可定量比较的蛋白数为2 957。将严重胎儿生长受限，小于胎龄胎儿2组病例组及正常对照组两两比较，严重胎儿生长受限组对比正常对照组鉴定到235个差异蛋白（包括137个上调蛋白和98个下调蛋白），小于胎龄胎儿组对比正常对照组鉴定到197个差异蛋白（包括111个上调蛋白和86个下调蛋白），严重胎儿生长受限组对比小于胎龄胎儿组鉴定到140个差异蛋白（68个上调蛋白和72个下调蛋白）。（2）基于质谱的靶向蛋白质组定量技术 （parallel reaction monitoring，PRM）验证17种显著差异蛋白，其中TPP1、PRL、CRP、EDN3、LAMA2、ERP29、PDIA3、IGFBPL1、CHRD、CTNNBIP1、ALPL、CTSL、ACE、CEL、AHSP共15个蛋白在病例组与对照组的比较中表达趋势与定量结果完全一致。（3）酶联免疫法检测10例严重生长受限胎儿及10例正常胎儿羊水的TFRC、GPX4浓度并比较差异，TFRC在严重生长受限胎儿组明显上调，GPX4在两组间差异无统计学意义。 结论:对生长受限胎儿的羊水用基于质谱的4D⁃Label⁃free Quantification（4D⁃LFQ）定量蛋白质组学进行研究，严重生长受限胎儿组对比正常组共鉴定到差异蛋白235个（137个上调，98个下调），小于胎龄胎儿组对比正常胎儿共鉴定到197个差异蛋白（111个上调，86个下调）。经基于质谱的靶向蛋白质组定量技术（PRM）验证显著差异蛋白，ELISA验证铁死亡通路相关蛋白，蛋白TPP1、PRL、CRP、EDN3、LAMA2、ERP29、PDIA3、IGFBPL1、CHRD、CTNNBIP1、ALPL、CTSL、ACE、CEL、AHSP、TFRC有望成为胎儿生长受限的生物标志物。
2026, 32(10):785-793.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250509.003
摘要:
SHC1 适配蛋白（SHC adaptor protein 1，SHC1）在肿瘤生物学过程中扮演关键角色，通过MAPK/ERK和PI3K/AKT/mTOR信号通路，调控肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭。诱导上皮‑间质转化，调节细胞骨架，影响肿瘤微环境，进而促进肿瘤侵袭和迁移。本文综述了SHC1在多种肿瘤中的作用机制，包括其对信号通路的调控、对细胞过程的介导以及对肿瘤微环境的影响。探讨了针对SHC1的治疗策略以及SHC1在肿瘤预后评估中的潜力，为肿瘤精准治疗和个体化医疗提供新思路。本研究深入解析SHC1在肿瘤增殖、迁移和侵袭的作用机制，为降低肿瘤增殖、侵袭和迁移提供了新视角。
SHC1 适配蛋白（SHC adaptor protein 1，SHC1）在肿瘤生物学过程中扮演关键角色，通过MAPK/ERK和PI3K/AKT/mTOR信号通路，调控肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭。诱导上皮‑间质转化，调节细胞骨架，影响肿瘤微环境，进而促进肿瘤侵袭和迁移。本文综述了SHC1在多种肿瘤中的作用机制，包括其对信号通路的调控、对细胞过程的介导以及对肿瘤微环境的影响。探讨了针对SHC1的治疗策略以及SHC1在肿瘤预后评估中的潜力，为肿瘤精准治疗和个体化医疗提供新思路。本研究深入解析SHC1在肿瘤增殖、迁移和侵袭的作用机制，为降低肿瘤增殖、侵袭和迁移提供了新视角。
2026, 32(10):794-800.
DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250924.002
摘要:
双硫死亡是近年来发现的一种新型细胞程序性死亡方式，其机制是细胞内二硫键积累所引发的细胞骨架损伤和程序性死亡。研究表明，双硫死亡与氧化应激、代谢紊乱及蛋白质稳态失衡密切相关，在多种疾病中发挥重要作用。慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种以持续性气流受限和慢性炎症为特征的呼吸系统疾病，其发病机制涉及氧化应激增强、蛋白酶⁃抗蛋白酶失衡及细胞死亡异常，导致肺泡结构破坏和肺功能进行性下降。COPD的氧化应激微环境与双硫死亡发生条件部分重叠，且其肺组织中双硫死亡相关基因表达异常。本文综述了双硫死亡的分子机制，探讨其与COPD的关系，并分析双硫死亡在COPD治疗中的潜在价值。此外，本文还讨论了目前研究的局限性及未来方向，为开发新型COPD治疗策略提供理论依据。
双硫死亡是近年来发现的一种新型细胞程序性死亡方式，其机制是细胞内二硫键积累所引发的细胞骨架损伤和程序性死亡。研究表明，双硫死亡与氧化应激、代谢紊乱及蛋白质稳态失衡密切相关，在多种疾病中发挥重要作用。慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种以持续性气流受限和慢性炎症为特征的呼吸系统疾病，其发病机制涉及氧化应激增强、蛋白酶⁃抗蛋白酶失衡及细胞死亡异常，导致肺泡结构破坏和肺功能进行性下降。COPD的氧化应激微环境与双硫死亡发生条件部分重叠，且其肺组织中双硫死亡相关基因表达异常。本文综述了双硫死亡的分子机制，探讨其与COPD的关系，并分析双硫死亡在COPD治疗中的潜在价值。此外，本文还讨论了目前研究的局限性及未来方向，为开发新型COPD治疗策略提供理论依据。
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